Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展极快的过程中逐渐扩展

从第一次浮现呼吸道自身突变到浮现1型号乳癌临床呕吐的重大突破不下在儿童时期就有不太好的描绘，多个呼吸道自身突变感染性的儿童除此以外70%在小鼠转换后10年末罹患乳癌，而随访15年的儿童这一比例提高到84%。相比较之下，分之一临床1型号乳癌一半以上的型号1型号乳癌的中风程序还没赢取合理的研究课题。

越来越多的人开始用作有系统系统对来定义1型号乳癌的重大突破：幼棒状在浮现多种呼吸道自身突变时进入第1收尾，浮现血糖异常时进入第2收尾，浮现呕吐时进入第3收尾。一些多发呼吸道自身突变感染性的幼棒状，在1期和2期，重大突破较较慢，并其发展为中风的1型号乳癌。我们此前描绘了一三组在首次探测到多种呼吸道自身突变试样后将近10年无乳癌的极较慢重大突破者，这三组病变总数不算，但特征非常确切。随后，我们找到呼吸道自身抗原特异性CD8+T亚基反应在重大突破较较慢的病变里面基本不假定，但在近期中风和长期假定的乳癌病变里面很易于探测到。这确实表明，与重大突破病变相比较，这些病变自身炎症的可调增强。

一时期研究课题表明，尽管可调性T亚基(Treg)数量正常，但乳癌病变假定一些特性瑕疵，其里面仅限于对IL-2的反应技能减小。此外，乳癌病变里面的effectCD4+T亚基确实对可调更具抵抗性，展示出为effectT亚基的可抑制减弱，共存归因于的Treg和棒状外归因于的诱导Treg，以及抗原经历的CD4+T亚基里面IL-2反应减弱。本研究课题的目的是描绘了CD4+可调性T亚基(Treg)在领头极较较慢重大突破者里面的特征，他们的平均年长为43岁(31-72岁)，随访短时间为18-32年。

方法：BOX研究课题是一项以人群蓝本的纵向研究课题，在21岁以下确诊的病变亲友里面检验1型号乳癌的危险各种因素。我们此前描绘了长期较较慢重大突破者的特征，他们保持多重呼吸道自身突变感染性超过10年，但没浮现乳癌的临床呕吐，较慢性或非展开性自身免疫。随后，10名继续保持无乳癌并不愿提供大量尿液试样的较较慢重大突破者划定T和B亚基特性深入研究。在目前的研究课题里面，8名较慢重大突破者(SP三组)，里面位年长43岁(31-72岁)，18 - 32岁之间的呼吸道自身突变感染性。所有的自发性都西北面1型号乳癌重大突破的1期，尽管一些人随后失去了呼吸道自身突变对某些抗原的感染性反应，然而，一名病变并未西北面2期将近6年，但没浮现临床呕吐，一名病变被诊断为乳癌，该受试者72岁，在收集实验试样时，其HbA1c急剧下降到53 mmol/mol(7%)，在建模里面对该酪氨酸展开了单独评估。除去外周血单个核亚基(PBMCs)，采用多值流式亚基妖术和T亚基可抑制试验评估酪氨酸里面Treg的增益、表现型号和特性。用作FlowSOM和CITRUS(聚类鉴定、并不一定和回归)展开无行政官员聚类深入研究，评估Treg表现型号。

结果：与肥胖酪氨酸相比较，来自较慢重大突破棒状的遗忘CD4+T亚基的行政官员聚类揭示，激活命的遗忘CD4+ Treg增益提高，与糖皮质激素诱导的TNFR相关亚基(GITR)解读提高有关。一名HbA1c急剧下降的病变与重大突破较较慢者和匹配的依此三组相比较，Treg明人有所多种不同。特性深入研究表明，与肥胖酪氨酸相比较，来自较较慢重大突破棒状的Treg诱导的CD4+effectT亚基可抑制相比较受损。展示出为对effectCD4+T亚基CD25和CD134解读的可抑制提高。

绘出1 有系统对的表现型号深入研究揭示，CD4+Treg免疫球亚基在较慢重大突破队列里面提高。由FlowSOM分解成的Treg三楼，聚集在来自所有酪氨酸的活命CD4+CD45RA -亚基上。根据标示物解读鉴定出10个元簇:遗忘T亚基_1;遗忘T cell_2;遗忘T cell_3;遗忘T cell_4;CD49b遗忘T亚基;HLA-DR + GITR +遗忘T亚基;CPUTreg_1;CPUTreg_2;CPUTreg_3;和CPUTreg_4。(a)用作9个多种不同Treg标示分解成的10个元簇的MST。每个端口代表一个炮兵部队(100个炮兵部队)，较大的元炮兵部队(10个元炮兵部队)在端口三组周围装裱。每个端口里面的饼绘出暗示单个标示的解读级别。(b)每个元聚类的热绘出，以揭示主棒状标示解读。(c, d)为HD三组(c)和SP三组(d)分解成绘出，以及FlowSOM识别的每个元簇的覆盖层。(e-l)相对来说稀土元素为每个metacluster盒两条路线绘出(稀土元素> 0.05%)确定为HD和SP三组:CPUTreg_2 (e),CPUTreg_3 (f),CPUTreg_4 (g), HLA-DR + GITR +遗忘T亚基(h)、遗忘T cell_1(i),遗忘T cell_2 (j),遗忘T cell_3 (k) n d CD49b遗忘T亚基(l)。浅蓝色左上角代表理应SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对字母秩探测。此键适用于绘出形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

绘出2 用作CITRUS的预报证实，Treg增益的提高是重大突破较较慢的徽章。分级门控(a - f)和柑橘深入研究(g-k)比较SP自发性和匹配的HD自发性在CD4+CD45RA−T亚基上的差异。(a)未成熟CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l社会阶层的代表性绘出。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR解读展开除去，模拟FlowSOM社会阶层。(b) HD(环纹)和SP(白斑)三组以及酪氨酸SP 606(浅蓝色)里面CD25+ cd127的增益核心内容绘出。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+门控集合的盒两条路线绘出;(c) HLA-DRloGITR−(CPUTreg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(CPUTreg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(CPUTreg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+CPUT cell)。(g - i)柑桔簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3解读其中心制做，左下角厚实的簇被识别为SP和HD队列之间的多种不同。(j)盒两条路线绘出揭示了在SP(白斑)和HD(灰点)三组里面，CITRUS遗忘Treg_3和Treg_4的相对来说稀土元素(比例)。(k)直方绘出揭示每个簇的表现型号(粉红色)和Treg标示相对来说解读与历史背景解读(蓝色);上列，CPUTreg_3;示意图一行，CPUTreg_4。历史背景与所有其他簇里面标示的解读有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对字母秩探测

绘出3 与肥胖献血者相比较，重大突破较较慢者遗忘treg的GITR提高。每个遗忘CD4+T亚基元簇(遗忘T亚基_1;遗忘T cell_2;遗忘T cell_3;CD49b +遗忘T亚基;HLA-DR + GITR +遗忘T亚基;CPUTreg_2;CPUTreg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)探测每个解读标示的变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)队列的解读热绘出(sp606不仅限于在内)。(c,d)遗忘Treg_4元簇里面所有HD(灰色)、所有SP(蓝色)和SP 606(浅蓝色)的FlowSOM GITR解读接在，揭示直方绘出(c)和核心内容绘出(d)。Wilcoxon配对字母秩和探测，p< 0.07(浅蓝色)所有酪氨酸仅限于，p< 0.05(蓝色)酪氨酸SP 606和匹配的HD不仅限于在测试里面。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs里面GITR解读，从分级门控，从所有HD(灰色)、所有SP(蓝色)和SP 606(浅蓝色)接在，揭示直方绘出(e)和核心内容绘出(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对字母秩探测

绘出4 来自较较慢重大突破的CD4+ treg亚基控制effectCD4+T亚基的技能减小。SP三组用蓝色的两条路线和左上角暗示，HD三组用红色的两条路线和左上角暗示，浅蓝色的两条路线/左上角暗示酪氨酸sp606。用作CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T亚基展开分选。CD4+CD25−(需要的话者)被标示为CFSE, Treg按捕捉到的比例滴定。用抗CD3 /28微珠活命化亚基，培训3在此之后展开流式亚基妖术探测。(a-d)与CD4+需要的话者相对来说应的treg培训(自棒状)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD需要的话者培训。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE可抑制一般而言(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的可抑制一般而言。用作感染性依此(激活命的拥护亚基不含treg)计算可抑制一般而言。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差深入研究。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

绘出5 effectCD4+T亚基对较较慢重大突破的T亚基活命化的可抑制更敏感。SP三组用蓝色的两条路线和左上角暗示，HD三组用红色的两条路线和左上角暗示，浅蓝色的两条路线/左上角暗示酪氨酸sp606。用作CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T亚基展开分选。CD4+CD25−(需要的话者)被cfsel标示，treg按捕捉到的比例滴定。用抗CD3 /28微珠活命化亚基，培训3在此之后展开流式亚基妖术(CD25反染)和亚基因侄深入研究。HD Treg与HD、SP或sp606需要的话者共同培训。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE可抑制%-(b)。(c,d) CD25可抑制%-(c)和CD134可抑制%-(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共培训里面的解读。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差深入研究。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

论点：我们得出的论点是，来自较较慢重大突破侄的活命化遗忘CD4+Treg在GITR解读里面赢取了扩张和非常丰富，务实了进一步研究课题Treg在1型号乳癌风险幼棒状里面的异质性的必要性。

原文出处：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28