Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展缓慢的过程中逐渐引入

从第一次再次不止现家兔自身抗本体到再次不止现1改进型高血压药理学征状的成效率在儿童时期就有很好的详细描述，多个家兔自身抗本体HIV的儿童中所有70%在人体内转换后10天内肺结核高血压，而随访15年的儿童这一%上升到84%。即便如此之下，占药理学1改进型高血压一半以上的改进型1改进型高血压的复发机制还从未受益充分的研究工作。

越来越多的人开始常用分期系统来假设1改进型高血压的成效：个本体在再次不止现多种家兔自身抗本体时进到第1过渡期，再次不止现体温异常时进到第2过渡期，再次不止现征状时进到第3过渡期。一些多发家兔自身抗本体HIV的个本体，在1期和2期，成效较快，并发展为复发的1改进型高血压。我们前详细描述了一四组在首次探测到多种家兔自身抗本体采样后仅仅10年无高血压的极慢成效者，这四组病变人口数较少，但大体上特征十分恰当。随后，我们发掘不止家兔自身淋巴细胞特异性CD8+T蛋白质中间体在成效加速的病变中所大体上不存在，但在近期复发和近十年存在的高血压病变中所很容易探测到。这也许表明，与成效病变即便如此，这些病变自身免疫中间体的调节增强。

越来越早研究工作表明，尽管调节性T蛋白质(Treg)%正常，但高血压病变存在一些功能缺点，其中所以外对IL-2的中间体依靠能力下降。此外，高血压病变中所的震荡CD4+T蛋白质也许对调节越来越具抵抗性，平庸为震荡T蛋白质的抑止减慢，自然转化成的Treg和本排泄转化成的其会Treg，以及淋巴细胞经历的CD4+T蛋白质中所IL-2中间体减慢。本研究工作的目地是详细描述了CD4+调节性T蛋白质(Treg)在一小群极加速成效者中所的大体上特征，他们的平均中年人为43岁(31-72岁)，随访时间段为18-32年。

方法：BOX研究工作是一项以人群为基础的纵向研究工作，在21岁以下肺癌的病变亲属中所核查1改进型高血压的危险因素。我们前详细描述了近十年加速成效者的大体上特征，他们保持多重家兔自身抗本体HIV大约10年，但从未再次不止现高血压的药理学征状，慢性或非开展性自身免疫。随后，10名继续保持无高血压并愿意备有大量血液采样的加速成效者纳入T和B蛋白质功能比对。在目前的研究工作中所，8名慢成效者(SP四组)，中所位中年人43岁(31-72岁)，18 - 32岁两者之间的家兔自身抗本体HIV。所有的参加者都属于1改进型高血压成效的1期，尽管一些人随后失去了家兔自身抗本体对某些淋巴细胞的HIV中间体，然而，一名病变已经属于2期仅仅6年，但从未再次不止现药理学征状，一名病变被诊断为高血压，该受试者72岁，在采集实验采样时，其HbA1c增大到53 mmol/mol(7%)，在数据比对中所对该供本体开展了单独审计。分开外周血单个中间体器蛋白质(PBMCs)，采用多匹配流式蛋白质忍术和T蛋白质抑止试验审计供本体中所Treg的增益、表改进型和功能。常用FlowSOM和CITRUS(聚类解剖、表征和回归)开展无监督聚类比对，审计Treg表改进型。

结果：与保健供本体即便如此，来自慢成效本体的潜意识CD4+T蛋白质的监督聚类看不止，激能活的潜意识CD4+ Treg增益上升，与糖皮质激素其会的TNFR相关蛋白质(GITR)表述上升有关。一名HbA1c增大的病变与成效加速者和冗余的比对四组即便如此，Treg谱各不相同。功能比对表明，与保健供本体即便如此，来自加速成效本体的Treg介导的CD4+震荡T蛋白质抑止相比受损。平庸为对震荡CD4+T蛋白质CD25和CD134表述的抑止上升。

示意图1 有系统的表改进型比对看不止，CD4+Treg亚改进型在慢成效表头中所上升。由FlowSOM转化成的Treg室，周围在来自所有供本体的能活CD4+CD45RA -蛋白质上。根据标明物表述解剖不止10个元簇:潜意识T蛋白质_1;潜意识T cell_2;潜意识T cell_3;潜意识T cell_4;CD49b潜意识T蛋白质;HLA-DR + GITR +潜意识T蛋白质;寄存器Treg_1;寄存器Treg_2;寄存器Treg_3;和寄存器Treg_4。(a)常用9个不同Treg标明转化成的10个元簇的MST。每个数据流值得一提的是一个坦克部队(100个坦克部队)，越来越大的元坦克部队(10个元坦克部队)在数据流四组周围制做。每个数据流中所的饼示意图对此单个标明的表述级别。(b)每个元聚类的热示意图，以看不止整本体标明表述。(c, d)为HD四组(c)和SP四组(d)转化成示意图，以及FlowSOM标识的每个元簇的很薄。(e-l)即便如此同位素为每个metacluster罐本站示意图(同位素> 0.05%)恰当为HD和SP四组:寄存器Treg_2 (e),寄存器Treg_3 (f),寄存器Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +潜意识T蛋白质(h)、潜意识T cell_1(i),潜意识T cell_2 (j),潜意识T cell_3 (k) n d CD49b潜意识T蛋白质(l)。蓝色带子值得一提的是**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验。此键适用于示意图形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

示意图2 常用CITRUS的预测模改进型证实，Treg增益的上升是成效加速的标志。国际标准相关联(a - f)和橄榄比对(g-k)比较SP参加者和冗余的HD参加者在CD4+CD45RA−T蛋白质上的区别。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群本体的值得一提的是性示意图。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富含，然后通过HLA-DR和GITR表述开展分开，模拟FlowSOM群本体。(b) HD(网纹)和SP(虎纹)四组以及供本体SP 606(蓝色)中所CD25+ cd127的增益核心内容示意图。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+相关联子集的罐本站示意图;(c) HLA-DRloGITR−(寄存器Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(寄存器Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(寄存器Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+寄存器T cell)。(g - i)玉米簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3表述切变制做，交叉突不止的簇被标识为SP和HD表头两者之间的不同。(j)罐本站示意图看不止了在SP(虎纹)和HD(灰点)四组中所，CITRUS潜意识Treg_3和Treg_4的即便如此同位素(%)。(k)直方示意图看不止每个簇的表改进型(白色)和Treg标明即便如此表述与背景表述(白色);上列，寄存器Treg_3;上头偷偷地，寄存器Treg_4。背景与所有其他簇中所标明的表述有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon配对符号秩检验

示意图3 与保健献血者即便如此，成效加速者潜意识treg的GITR上升。每个潜意识CD4+T蛋白质元簇(潜意识T蛋白质_1;潜意识T cell_2;潜意识T cell_3;CD49b +潜意识T蛋白质;HLA-DR + GITR +潜意识T蛋白质;寄存器Treg_2;寄存器Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)探测每个表述标明的转变。(a,b)来自HD (a)和S (b)表头的表述热示意图(sp606不以外在内)。(c,d)潜意识Treg_4元簇中所所有HD(灰色)、所有SP(白色)和SP 606(蓝色)的FlowSOM GITR表述串联，看不止直方示意图(c)和核心内容示意图(d)。Wilcoxon配对符号秩和检验，p< 0.07(蓝色)所有供本体以外，p< 0.05(白色)供本体SP 606和冗余的HD不以外在测试中所。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs中所GITR表述，从国际标准相关联，从所有HD(灰色)、所有SP(白色)和SP 606(蓝色)串联，看不止直方示意图(e)和核心内容示意图(f) *p< 0.05, Wilcoxon配对符号秩检验

示意图4 来自加速成效的CD4+ treg蛋白质依靠震荡CD4+T蛋白质的依靠能力下降。SP四组用白色的本站和带子对此，HD四组用银色的本站和带子对此，蓝色的本站/带子对此供本体sp606。常用CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T蛋白质开展分选。CD4+CD25−(反之亦然者)被标明为CFSE, Treg按掩蔽的%滴定。用抗CD3 /28微珠能再生蛋白质，养成3天后开展流式蛋白质忍术探测。(a-d)与CD4+反之亦然者即便如此不应的treg养成(自本体)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD反之亦然者养成。(a,b,f) CFSE增殖(a,e)和CFSE抑止百分比(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的抑止百分比。常用HIV比对(激能活的响不应蛋白质包含treg)量度抑止百分比。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差比对。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

示意图5 震荡CD4+T蛋白质对加速成效的T蛋白质能再生的抑止越来越寻常。SP四组用白色的本站和带子对此，HD四组用银色的本站和带子对此，蓝色的本站/带子对此供本体sp606。常用CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T蛋白质开展分选。CD4+CD25−(反之亦然者)被cfsel标明，treg按掩蔽的%滴定。用抗CD3 /28微珠能再生蛋白质，养成3天后开展流式蛋白质忍术(CD25反染)和蛋白质因子比对。HD Treg与HD、SP或sp606反之亦然者联合养成。(a,b) CFSE增殖(a)和CFSE抑止调升(b)。(c,d) CD25抑止调升(c)和CD134抑止调升(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共养成中所的表述。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差比对。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

论点：我们断定的论点是，来自加速成效子的能再生潜意识CD4+Treg在GITR表述中所受益了扩展和丰富，强调了进一步研究工作Treg在1改进型高血压风险个本体中所的异质性的有效性。

原文典故：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28